Tlmivé roztoky sú kvapaliny na báze vody, ktoré obsahujú slabú kyselinu a jej konjugovanú bázu. Kvôli svojej chémii môžu tlmivé roztoky udržiavať pH (kyslosť) na takmer konštantnej úrovni, aj keď sa vyskytujú chemické zmeny. Pufrovacie systémy sa vyskytujú v prírode, ale sú tiež veľmi užitočné v chémii.
Použitie pre tlmivé roztoky
V organických systémoch udržujú prírodné tlmivé roztoky pH na konštantnej úrovni, čo umožňuje, aby biochemické reakcie prebiehali bez poškodenia organizmu. Keď biológovia študujú biologické procesy, musia si udržiavať rovnaké konzistentné pH; na to použili pripravené tlmivé roztoky. Tlmivé roztoky boli prvýkrát opísané v roku 1966; dnes sa používa veľa rovnakých pufrov.
Aby boli užitočné, biologické pufre musia spĺňať niekoľko kritérií. Konkrétne by mali byť rozpustné vo vode, ale nie rozpustné v organických rozpúšťadlách. Nemali by byť schopní prechádzať cez bunkové membrány. Okrem toho musia byť netoxické, inertné a stabilné počas všetkých experimentov, na ktoré sa používajú.
Tlmivé roztoky sa prirodzene vyskytujú v krvnej plazme, a preto si krv udržuje konštantné pH medzi 7,35 a 7,45. Tlmivé roztoky sa používajú aj v:
- fermentačné procesy
- bieliace tkaniny
- chemická analýza
- kalibrácia pH metrov
- Extrakcia DNA
Čo je Tris Buffer Solution?
Tris je skratka pre tris (hydroxymetyl) aminometán, chemickú zlúčeninu, ktorá sa často používa v soľnom roztoku, pretože je izotonická a netoxická. Pretože má Tris pKa 8,1 a hladinu pH medzi 7 a 9, Tris pufrové roztoky sa tiež bežne používajú v rade chemických analýz a postupov vrátane extrakcie DNA. Je dôležité vedieť, že pH v tris tlmivom roztoku sa mení s teplotou roztoku.
Ako pripraviť Tris Buffer
Je ľahké nájsť komerčne dostupný roztok tris pufra, ale je možné si ho vyrobiť pomocou vhodného zariadenia.
materiály:
Vypočítajte množstvo každej položky, ktoré potrebujete, na základe molárnej koncentrácie požadovaného roztoku a množstva potrebného tlmivého roztoku.
- tris (hydroxymetyl) aminometán
- destilovaná deionizovaná voda
- HCl
postup:
- Začnite stanovením, akú koncentráciu (molarita) a objem vyrovnávacej pamäte Tris, ktorú chcete vytvoriť. Napríklad Tris tlmivý roztok používaný pre fyziologický roztok sa pohybuje od 10 do 100 mM. Akonáhle ste sa rozhodli, čo robíte, vypočítajte počet mólov Tris, ktoré sú potrebné vynásobením molárnej koncentrácie tlmivého roztoku objemom pripraveného tlmivého roztoku. (móly Tris = mol / L x L)
- Ďalej stanovte, koľko gramov Tris je vynásobením počtu mólov molekulovou hmotnosťou Tris (121,14 g / mol). gramy Tris = (moly) x (121,14 g / mol)
- Tris sa rozpustí v destilovanej deionizovanej vode, 1/3 až 1/2 požadovaného konečného objemu.
- Mieša sa v HCI (napr. 1 M HCI), kým sa nedosiahne pH meter vám poskytne požadované pH pre váš tlmivý roztok Tris.
- Tlmivý roztok sa zriedi vodou tak, aby sa dosiahol požadovaný konečný objem roztoku.
Akonáhle je roztok pripravený, môže sa skladovať mesiace na sterilnom mieste pri izbovej teplote. Dlhá doba použiteľnosti tlmivého roztoku Tris je možná, pretože roztok neobsahuje žiadne proteíny.