Lyofilizácia, známa tiež ako lyofilizácia, je proces používaný na konzerváciu biologického materiálu odstránením voda zo vzorky, ktorá zahŕňa najprv zmrazenie vzorky a jej následné vysušenie vo vákuu pri veľmi nízkej teplote Teploty. Lyofilizované vzorky sa môžu skladovať oveľa dlhšie ako neošetrené vzorky.
Prečo sa používa lyofilizácia?
Lyofilizácia alebo lyofilizácia bakteriálnych kultúr, stabilizuje kultúry na dlhodobé skladovanie a zároveň minimalizuje poškodenie, ktoré môže byť spôsobené prísnym vysušením vzorky. Mnohé mikroorganizmy prežívajú dobre, keď sú lyofilizované, a môžu sa po dlhšom čase skladovania ľahko rehydratovať a pestovať v kultivačnom médiu.
Lyofilizácia sa tiež používa v biotechnológie a biomedicínsky priemysel na uchovávanie vakcín, vzoriek krvi, purifikované proteínya iný biologický materiál.
Tento krátky laboratórny postup sa môže použiť s akýmkoľvek komerčne dostupným mraziacim sušičom, aby sa zachovala vaša zbierka kultúr.
Proces
Proces lyofilizácie je vlastne aplikácia fyzikálneho javu nazývaného sublimácia: prechod látky z pevného do plynného stavu bez toho, aby najprv prešiel kvapalinou fáza. Počas lyofilizácie sa voda zo zmrazenej vzorky odstráni ako vodná para bez toho, aby sa vzorka najskôr rozmrazila.
Bežné chyby
Jednou z najčastejších chýb, pokiaľ ide o lyofilizáciu, je nevedenie bodu topenia vzorky, čo sťažuje výber správneho lyofilizátora. Počas procesu sa vaše vzorky môžu topiť. Ďalšou častou chybou je, že chladnejšie myslenie je lepšie, keď sušíte vymrazovaním v mrazničke s policami. Počas primárneho sušenia by ste mali nastaviť teplotu police tesne pod eutektickú teplotu vzorky. Mala by existovať len dostatočná teplota na povzbudenie molekúl vzorky, aby sa pohybovali - ale aby sa zabránilo roztaveniu.
Treťou chybou je použitie nesprávneho vybavenia pre vaše vzorky. Pretože sa mraziace sušiče používajú v skupinovom prostredí, mali by ste pred zakúpením niektorého z nich vedieť tieto informácie:
- Koľko vlhkosti bude lyofilizovaná
- Čo je to vzorka (a eutektická teplota)
- Ako správne používať mrazničku
Ak sa jednotka nepoužíva správne, mohla by zničiť všetky vzorky. Čo nás privádza k ďalšej bežnej chybe: neudržiavanie vývevy. Aby fungovala lyofilizácia, musí byť čerpadlo vo vynikajúcom funkčnom stave. Prevádzka čerpadla s predradníkom plynu otvoreným 30 minút pred a po procese lyofilizácie zvýši životnosť čerpadla. Otvorenie predradníka plynu odstráni nečistoty z čerpadla, aby sa zabránilo poškodeniu vnútorných komponentov. Olej čerpadla by ste mali často kontrolovať, či nemá zafarbenie a častice, a podľa potreby olej vymieňajte. Pravidelné výmeny oleja udržujú čerpadlo v priebehu procesu sušenia vymrazovaním v optimálnom vákuu.
A nakoniec, mať nesprávne lyofilizačné príslušenstvo pre váš lyofilizačný proces môže byť veľkou chybou. Potrebujete vzorku pod zátkou? Potom je potrebná uzatváracia komora. Mrazíte v bankách mrazom? Potom nezabudnite mať sušiacu komoru s otvormi.
Ak sa vyhnete vyššie uvedeným chybám, môžete poskytnúť lepšiu starostlivosť o sušičku a čerpadlo na sušenie a získať lepšie vzorky po dokončení sušenia.
Referencie
Labconco News. "5 najčastejších chýb v lyofilizačnom procese."